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https://hdl.handle.net/20.500.14094/E0007164

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メタデータID
E0007164
アクセス権
metadata only access
出版タイプ
Not Applicable (or Unknown)
タイトル
CL-調節機構におけるcalcineurinおよびcalcineurin関連遺伝子の役割
CL チョウセツ キコウ ニ オケル CALCINEURIN オヨビ CALCINEURIN カンレン イデンシ ノ ヤクワリ
その他のタイトル
The role of Calcineurin and Calcineurin - related Genes in the Regulation of Cl- homeostasis
著者
著者名
根井, 耕治
Nei, Koji
ネイ, コウジ
所属機関名
神戸大学医学部薬理学教室
言語
Japanese (日本語)
English (英語)
収録物名
神戸大学医学部紀要
Medical journal of Kobe University
巻(号)
56(2)
ページ
115-120
刊行日
1996-07
抄録
細胞内CH^-(塩素イオン)濃度は種々の輸送体により調節されていると考えられているが,その分子レベルでの制御機構は殆ど不明である。C1^-調節機構は,真核生物において広く保存されていると考えられるため,本研究においては,分子遺伝学的解析が容易な分裂酵母モデル系を用いて. C1^-調節機構を解析した。分裂酵母の遺伝子に突然変異を誘発した約42,000コロニーの中からC1^-に超感受性を示す変異株をレプリカ法で25種単離した。また,変異株間で相補性試験を行った結果,変異株は. 19種類の遺伝子座位(cls1-cls19)に分類され、cls1は6個, cls2は2個, cls3～cls19は1個のalleleからなった。cls1は,遺伝子クローニングの結果,分裂酵母calcineurinの触媒サプユニットをコードするppbJ^+遺伝子座位における変異体である事が明らかとなった。ppbJ^+遺伝子破壊株を作製し,その生育に対する陰イオン,陽イオン,浸透圧. pHの影響を調べた結果,ppb1破壊株はC1^-に高い感受性を示すことが明らかとなった。さらにcls2～cls19の18種の変異株のうち,FK506に感受性を示すものが14種を占めた。以上のことから. ca1cineurin及びcalcineurinと機能的に関連する遺伝子がC1^-調節に重要であることが示唆された。
Intracellular Cl^- concentration is thought to be regulated by various transporters. However, its molecular regulatory mechanism is unknown. It is suggested that eucaryotic cells have conserved Cl^- regulatory system. In this study, S. pombe was used as a model system for genetic analysis to examine the molecular mechanism of Cl^- regulation. 25 independent mutant strains which are supersensitive to Cl^- were obtained by replica-plating about 42,000 mutagenized colonies, and complementation test was done by crisscrossing each of the mutant strains and 19 genomic loci (cls1-19) were identified. We found 6 alleles at the cls1, 2 alleles at the cis2, 1 allele at the cls3-19. The nucleotide sequence of the cis1 gene was identical to that of ppb1^+ gene, which encodes a catalytic subunit of calcineurin of S. pombe. We performed ppbr gene disruption, and examined the effects of anions, cations, osmolarity, and pH on the growth of the ppb1 null mutant. As the result, we found that ppb1 null showed severe growth defect in the presence fo high et concentration. In addition, 14 out of 18 mutants (cls2-19) are sensitive to FK506. These findings suggest that the calcineurin gene and the calcineurin-related genes play a critical role in the regulation of Cl^- homeostasis.
キーワード
分裂酵母
calcineurin
酵母遺伝学
FK506
C1^-調節機構
S. pombe
calcineurin
yeast genetics
FK506
Cl^- homeostasis
カテゴリ
紀要論文