神戸大学附属図書館デジタルアーカイブ
https://hdl.handle.net/20.500.14094/E0007184

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メタデータ

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メタデータID
E0007184
アクセス権
metadata only access
出版タイプ
Not Applicable (or Unknown)
タイトル
成長軟骨帯における肥大軟骨細胞のアポトーシス発現
セイチョウ ナンコツタイ ニオケル ヒダイ ナンコツ サイボウ ノ アポトーシス ハツゲン
その他のタイトル
Apoptosis of hypertrophic chondrocytes in growth plate
著者
藤田, 郁夫 ; 伊藤, 宏 ; 水野, 耕作 ; 平田, 総一郎
著者名
藤田, 郁夫
Fujita, Ikuo
フジタ, イクオ
所属機関名
神戸大学医学部第一病理
著者名
伊藤, 宏
Itoh, Hiroshi
イトウ, ヒロシ
所属機関名
神戸大学医学部第一病理
著者名
水野, 耕作
Mizuno, Kosaku
ミズノ, コウサク
所属機関名
神戸大学医学部整形外科
著者名
平田, 総一郎
Hirata, Soichiro
ヒラタ, ソウイチロウ
所属機関名
神戸大学医学部保健学科
言語
Japanese (日本語)
English (英語)
収録物名
神戸大学医学部紀要
Medical journal of Kobe University
巻(号)
57(3)
ページ
125-132
刊行日
1997-03
抄録
内軟骨性骨化においては,軟骨細胞が連続的に成長過程を経て肥大軟骨細胞に成熟する。この細胞の最終的運命については死かあるいは生存し骨芽細胞としての形質を獲得するか未だ明かでない。近年種々の組織の発生,分化において必然的な細胞死であるアポトーシス(apoptosis)の関与が報告されている。今回ラット腔骨近位成長軟骨帯における軟骨細胞のアポトーシスに特徴的なDNA断片化部位についてnick end labeling法を用いて組織学的に検討した。さらにラット肋骨の成長軟骨帯から分離した軟骨細胞のベレット化培養系を用いて,軟骨細胞のアポトーシス発生の有無について検討した。脛骨成長軟骨帯のnick end labeling法による組織学的検討では,肥大軟骨細胞のDNA断片化が認められた。培養成長軟骨細胞は培養2週日よりベレット中心部の細胞が肥大軟骨細胞へと分化し. nick end labeling法にてこれらの細飽のDNA断片化が認められた。さらに培養軟骨細胞より抽出したDNAのアガロースゲル電気泳動法による検討では,培養第1週から3週にかけてアポトーシスに特徴的なDNAの梯子形成がみられた。したがって成長軟骨帯においては,軟骨細胞の肥大成熟化に伴い,アポトーシスの過程によって細胞死を生じることが明らかとなった。さらにこの過程は,軟骨細胞の単独での培養下にも観察されたことより,細胞内にプログラムされている可能性があると考えられた。
We investigated the possible involvement of apoptosis of chondrocytes in the process of endochondral ossification of the rat growth plate utilizing in situ detection of DNA fragmentation, a hallmark of apoptosis·, and gel-electrophoresis. The DNA fragmentation of hype~trophic chondrocytes in the growth plate of 3-week old Wistar rat distal tibiae was revealed by an end-Iabeling technique. For the in vitro study, 1 X 10^5 of chondrocytes isolated from 3-week old rat rib growth plate were suspended in lm1 DMEM containing 10% fetal calf serum and 50μg/ ml ascorbic acid. Cells were spun down at 1500rpm. The formed pellet was cultured with fresh medium. In pelleted chondrocyte cultures, with the appearance of a ca1cificated matrix identified by Kossa's staining, immature chondrocytes differen-tiated to hypertrophicchondrocytes. This was confirmed immunohistochemically by using monoclonal antibody against rat type X collagen at 2 weeks in culture. At this time, DNA fragmentation was detected in hyper-trophic chondrocytes by an end-Iabeling techique. The agarose gel-electrophoresis of DNA obtained from the pelleted chondrocyte cultures between 1 and 3 weeks yielded the typical ladder formation, characteristic of apoptosis. From the in vivo studies, the histological analysis of the tibial growth plate demonstrated that the hypertrophic chondrocytes bear fragmented DNA, so the cellular death program is already in progress in this zone. The cultured pelleted chondrocytes, although maintained under nutrient conditions, were capable of dying in the absence of any other cell type. We conclude from these studies that the chondrocytes in the growth plate are programmed to self-annihilate. by apoptosis and that the apoptotic process is closely associated with cells committed to hypertrophy.
キーワード
アポトーシス
成長軟骨帯
軟骨細胞
内軟骨性骨化
カテゴリ
紀要論文